형질전환실험세트5
형질전환 실험세트5 (블루/화이트 클로닝)
Blue/White Cloning of a DNA Fragment and Assay of B-galactosidase

pUC 다중연결자리에서 DNA가 다른 벡터로 옮겨지거나 조작될 때, ß-갈락토시다제 생성이 중단되어, 세포가 X-Gal을 가수분해 할 수 없게 됩니다.
이로 인해 청색 콜로니를 배경으로 그 위에 백색 콜로니가 생성됩니다. 이 실험은 선형 플라스미드 및 T4 DNA 리가제와 함께 DNA 조각을 제공합니다.
재조합 플라스미드를 이용하여 대장균을 형질전환 시키고 항생제 내성과 백색 및 청색 콜로니의 수를 관찰합니다.
모듈 1: ligation 모듈 2: transformation 모듈 3: ß-galactosidase 분석


실험 가능 횟수 및 인원

  • 10조
실험소요시간

  • 준비-50분, 형질전환-15분, 인큐베이션-하룻밤 (E.coli source plate 미리 준비시)
필요장비

  • 피펫, 피펫팁, 항온수조 2개, 온도계, 인큐베이션오븐, 얼음, 마킹펜, 분젠버너, 핫플레이트 또는 전자레인지, 장갑, 장파장 UV광원
구성

  • Instructions, BactoBeads™, plasmid DNA, IPTG, ampicillin, transformation solution, ReadyPour™ Luria Broth Agar, sterile, recovery broth, petri plates, sterile pipets, loops and microtubes.
보관

  • 일부 구성물은 냉장과 냉동 보관필요